Plasmidisolierung

Material

Sie benötigen:

  • 20 ml Reagenzgläser mit Alukappe
  • LB-Bouillon (Lennox) (Merck, 1.00547.0500)
  • Inkubationseinheit zur Züchtung der E. coli Zellen, oder alternativ:
  • pUC-haltige E. coli JM109 oder besser DH5-alpha (DSMZ 3424, oder NUGI)
  • Ampicillin-Stammlösung: 10 mg Ampicillin-Natriumsalz gelöst in 1 ml Wasser, sterilfiltriert in sterilem Eppendorfreaktionsgefäß. Bei -20°C kann diese Lösung mehrere Wochen aufbewahrt werden.
  • Qiagen MiniPrep Kit (50 Reaktionen, 27104)
  • automatische 1000 µl und 100 µl Pipetten im Ständer
  • dazu passende, sterile blaue und gelbe Pipettenspitzen in Pipettenboxen
  • 2 ml Eppendorfreaktionsgefäße
  • sterile 1 ml Eppendorfreaktionsgefäße in einem verschlossenen Einweckglas
  • Pinzette zum entnehmen der sterilen Eppendorfreaktionsgefäße
  • Ethanol in einer Plastikpetrischale zum abflammen der Pinzette und der Kulturgefäße
  • Ständer für die Eppendorfreaktionsgefäße
  • Tischzentrifuge zum abzentrifugieren von Eppendorfreaktionsgefäßen
  • Materialien für eine Agarosegelelektrophorese

Abbildung 1: Plasmidisolierungskit mit Reagenzien